(1)波長校正：使用光電比色計或分光光度計,，在更換光源燈、重新安裝,、搬運或檢驗后,，以及儀器工作不正常時，都要進行波長校正,。就是正常工作的儀器,，每隔一個月也要檢查一次波長，必要時進行校正,，這樣才能保證波長讀數(shù)與通過樣品的波長符合,，保證儀器的大靈敏度,。方法常用譜釹濾光片校正法,，適用于721型儀可見光區(qū)的波長校正，常以585nm或529nm處的吸收峰或T%為標(biāo)準(zhǔn),。鑒于721型儀器的出射光波長較寬,，不易將573nm和585nm的兩峰或兩谷分開，校正時易產(chǎn)生誤差,，故推薦用529nm處的峰或谷為標(biāo)準(zhǔn)來進行波長校正,。校正時，將儀器按要求預(yù)熱,。要求電源電壓穩(wěn)定,。波長度盤置580nm處，T%調(diào)至大,，在比色杯處放一白紙條,，觀察是否有光強均勻、邊沿?zé)o光暈或雜光的光斑,，如不符合要求,，可調(diào)節(jié)燈泡位置使其符合要求,，是為波長校正的粗調(diào)。再把靈敏度扭置于1(低檔),，波長度盤對準(zhǔn)529nm,，電表機械零點為零，在光路空缺時調(diào)T%為100%T,，并反復(fù)查零點和100%T穩(wěn)定情況,。將譜釹濾光片插進光路，慢慢旋轉(zhuǎn)波長度盤,，找到透光率低的一點(向左右微旋波長度盤時,，該點透光率值均增加)，這一點即為波長529nm,。檢查波長度盤的指示值是不是529nm,，如指示值為534nm，此時波長工誤差為5nm,，超出規(guī)定(±1nm)必須進行調(diào)整,。

調(diào)整方法：將波長度盤對準(zhǔn)529nm，從光路取出譜釹濾光片,，光路空缺時調(diào)電表指針到100%T,，再將譜釹濾光片插進光路。打開儀器左側(cè)小蓋板,，找到波長校正螺絲(3個中左側(cè)柄長的一個);反時針方向微微調(diào)節(jié)(負誤差時順時針方向),，使電表指針的指示T%為低。反復(fù)檢查波長誤差情況,，直到符合儀器技術(shù)指標(biāo)為止,。蓋好左側(cè)小蓋板，校正結(jié)束,。

有些儀器,，可使用氫燈或置譜釹濾光片于測定比色槽內(nèi)，編進濾工掃描程序后,，儀器即可自動地在一定波長范圍內(nèi)進行波長校正,。分光光度儀的光學(xué)系統(tǒng)密封在一個單元組件內(nèi)，若發(fā)生故障,，波長不準(zhǔn),，常須請制造商派專人修理。其它尚有譜線校正法,、干涉濾光片校正法和有色溶液校正法等,，可參考有關(guān)資料。

(2)線性檢查：線性檢查包括儀器線性及測定方法線性兩個方面的檢查,。線性誤差表現(xiàn)為溶液的濃度與吸光度不成線性關(guān)系,，出現(xiàn)正偏離或負偏離的現(xiàn)象,。這種偏離，按比耳定律的現(xiàn)象來自兩個方面：一是溶液本身不符合比耳定律,，這種現(xiàn)象叫做化學(xué)偏離;二是儀器本身各種因素的影響,，使吸光度測定值與濃度之間不成線性關(guān)系，這種現(xiàn)象叫儀器偏離,。此處研究的是后者,。儀器偏離的因素很多，如雜光,、有限帶寬,、檢測器噪聲、環(huán)境條件變化,、波長的變動,、比色杯的誤差、輻射光的非平行性,、檢測器本身的非線性等,。

儀器線性檢查常用一種在一定波長及一定濃度范圍內(nèi)確知其服從比耳定律的有色物質(zhì)，配成不同濃度的溶液,，來檢查儀器本身是否能如實地反映有色物質(zhì)的濃度變化,。這種檢查方法與任何被測物質(zhì)呈色反應(yīng)等方法學(xué)上的題目無關(guān)。用測得的吸光度對濃度作圖,，在理想情況下應(yīng)是一條直線,。常用的方法是用0.8、1.6,、2.4,、4.0mg/L伊文藍濃度系列來檢查，波長用610nm,。

(3)雜光(散光)檢查：在吸光度測定中,，凡檢測器感受到的不需要的輻射都稱為雜光。雜光對吸光度測定法的正確性有嚴(yán)重的影響,，但卻往往被忽視。雜光的來源有：①儀器本身的原因,，如單色器的設(shè)計,、光源的光譜分布、光學(xué)原件的老化程度,、波帶寬度以及儀器內(nèi)部的反射及散射等;②室內(nèi)光線過強而漏進儀器,，儀器暗室蓋不嚴(yán);③樣品本身的原因，如樣品有無熒光,、樣品的散射能力強弱等,。

雜光檢測方法：①紫外光區(qū)的雜光監(jiān)測可用10±0.1g/L的碘化納溶液,，在240nm處測定的吸光度應(yīng)大于2.00。此外,，也可用12g/L的氯*鉀溶液,，在220nm處測其透光度，即為雜光量,，一般應(yīng)小于1%T,。以上測定均用石英杯，以蒸餾水校零,。②在可見光區(qū)可使用譜釹濾光片或硫酸鎳法檢查,。先用譜釹濾片校正波長，然后用黑紙片擋住比色杯光路(進口儀器帶有比色杯樣玄色標(biāo)柱)之后調(diào)整0%T,，再用空氣做空缺調(diào)100%T,。插進譜釹濾光片，在585nm處測定,，其測定值即為雜光水平,。

(4)比色杯的質(zhì)量檢查：比色杯一般由玻璃、石英或熒石制成,，光徑1.0或0.5cm,光線通過期有一部分光為空氣與玻璃接觸面的反射而損失(4%),，另一部分(很少)為玻璃吸收。比色杯的質(zhì)量除其原料外,，再就是玻璃的厚度均勻,，上下一致，各杯彼此相配,。廠家多以四個一套供給,，且杯口上部外面標(biāo)有箭頭，箭頭對光源側(cè)使用,。盡管如此,，在使用前還是應(yīng)作質(zhì)量檢查。常用伊文藍法：將一定量的2.0mg/L的伊文藍溶液注進比色杯中,，比色杯內(nèi)液面應(yīng)相等,。用一個比色杯作標(biāo)準(zhǔn)，用紅色濾光片(波長600～610nm),，用水校零后將此杯的讀數(shù)正確調(diào)至50%T,，接著讀取其余杯的透光度。透光度相差在±0.5%T范圍內(nèi)者為合格,。

(5)穩(wěn)定性檢查：檢查方法：將分光光度計及附件接于0.5kVA以上的可調(diào)變壓器,，先調(diào)電壓為220V，波長固定在650nm,，在光路比色杯裝以空缺液,，調(diào)讀數(shù)為90%T處,，再將電壓升至230V及降至190V，觀察透光度的漂移值,。若介于88.5%～91.5%T之間為合格,。在電源電壓不變的條件下，在3分鐘內(nèi)其讀數(shù)漂移不應(yīng)超過標(biāo)尺上限值的±0.5%,。

(6)重復(fù)性檢查：在波長,、工作狀態(tài)、電源電壓,、比色杯配套等合格的條件下,，進行重復(fù)檢查。在用交流電源供電時,，儀器對一種溶液重復(fù)測定的讀數(shù)值差應(yīng)小于或即是標(biāo)尺上限值的1%,。試驗方法：將分析純重絡(luò)酸鉀于120～150攝氏度烘干2小時，干燥器中冷卻,。精稱509.1mg于1000ml容量瓶中,，以蒸餾水溶解并加至刻度，混勻(此液180mg/L鉻),。就用液為30,、60、180mg鉻/L,。取波長440nm,，將應(yīng)用液各濃度管連續(xù)測3～5次，各濃度管中大誤差小于1%T為合格,。

(7)靈敏度檢查：將重鉻酸鉀液配制成30和32.5mg鉻/L及120和122.5mg/L鉻的4種應(yīng)用液(濃度差兩組各為2.5mg/L鉻),。波長440nm，以水校零點,，將上述應(yīng)用液連續(xù)測3次吸光度,，兩組2.5mg/L鉻濃度差的吸光度值差都不小于0.01為合格。